訂(ding)購信息:
產品名稱 | 鼠疫桿菌(YP)核酸檢測試劑盒 |
規格 | 48T/盒 |
類別 | 熒光-PCR法 |
產品名稱:鼠疫桿菌(YP)核酸檢測試劑盒
規格:48T/盒
分類(lei):熒光-PCR法
儲(chu)存(cun)條(tiao)件:-20℃避(bi)光保存(cun),避(bi)免反復凍融。
運輸(shu):低溫、避光,快遞免費送貨上門(men)。
特點:
1.即(ji)(ji)開即(ji)(ji)用(yong),用(yong)戶只(zhi)需要提供樣品(pin) DNA 模板,操作(zuo)簡單,定量準確快速(su)。
2. 引(yin)物(wu)(wu)經過優化,特(te)異性強。預期的 PCR 產物(wu)(wu)長度為 560 bp。
3. PCR mix 中(zhong)含上樣(yang)染料,PCR 后(hou)可以(yi)直(zhi)接上樣(yang)電泳。
4. 提(ti)供陽性(xing)對照,便于分析試驗結果。注意事(shi)項:
1.基礎程序;
2.擴增溫(wen)度和延伸(shen)溫(wen)度;
3.反應時間;
4.循環次數;
5.PCR 反應(ying)液的配制;
6.PCR技術的基本原理;
7.PCR的反應(ying)動力學;
8.PCR擴增產物;
9.PCR反應(ying)體系(xi)與反應(ying)條件(jian)。
使用(yong)及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定(ding)因素(su)為:
①引(yin)物與(yu)模板DNA特異正確的結合;
②堿(jian)基配對(dui)原則;
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶合(he)成反應的(de)忠實性(xing);
④靶基因(yin)的特異性與保(bao)守(shou)性。
其(qi)中引物(wu)與(yu)模(mo)板的(de)(de)正(zheng)確結(jie)合(he)(he)是關(guan)鍵。引物(wu)與(yu)模(mo)板的(de)(de)結(jie)合(he)(he)及引物(wu)鏈的(de)(de)延伸是遵循堿基配對原則的(de)(de)。聚(ju)合(he)(he)酶合(he)(he)成反(fan)應的(de)(de)忠實性及Taq DNA聚(ju)合(he)(he)酶耐高溫(wen)(wen)性,使反(fan)應中模(mo)板與(yu)引物(wu)的(de)(de)結(jie)合(he)(he)(復性)可以在(zai)較高的(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)下進行,結(jie)合(he)(he)的(de)(de)特(te)異(yi)性大大增加(jia),被擴增的(de)(de)靶基因(yin)片段也就能保(bao)持很(hen)高的(de)(de)正(zheng)確度(du)。再通過(guo)選擇特(te)異(yi)性和保(bao)守性高的(de)(de)靶基因(yin)區,其(qi)特(te)異(yi)性程度(du)就更(geng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wu)的(de)(de)生成量是(shi)以(yi)指數方式(shi)增加的(de)(de),能(neng)將皮(pi)克(pg=10-12g)量級的(de)(de)起始待測(ce)模(mo)板擴增到微(wei)克(ug=10-6g)水平。能(neng)從100萬個(ge)細胞中檢(jian)出(chu)一個(ge)靶細胞;在(zai)病毒的(de)(de)檢(jian)測(ce)中,PCR的(de)(de)靈敏度可達3個(ge)RFU(空斑(ban)形成單位);在(zai)細菌學(xue)中zui小檢(jian)出(chu)率為3個(ge)細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高(gao)溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液(ye)加好后,即在(zai)DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和水浴鍋(guo)上(shang)進行變(bian)性-退火-延(yan)伸反應,一般在(zai)2~4 小時完成擴(kuo)增(zeng)反應。擴(kuo)增(zeng)產物一般用電泳分析,不一定要(yao)用同(tong)位素,無放射性污染(ran)、易推廣。
(4) 對標本的純度要(yao)求低
不需要分離病毒或細(xi)菌及(ji)培養細(xi)胞(bao),DNA 粗(cu)制品(pin)及(ji)總RNA均可作為(wei)擴增(zeng)模板。可直接用臨床標本如(ru)血(xue)液、體(ti)腔(qiang)液、洗嗽液、毛發、細(xi)胞(bao)、活PCR技術概(gai)論。