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產品名稱 | 鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測試劑盒 |
規格 | 48T/盒 |
類別 | 熒光-PCR法 |
產品名稱:鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測試劑盒
規格:48T/盒
分(fen)類:熒(ying)光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保(bao)存,避免反復凍(dong)融。
運輸:低溫(wen)、避光,快遞免費送貨上(shang)門。
特點:
1.即(ji)開即(ji)用,用戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供樣品 DNA 模板(ban),操作(zuo)簡(jian)單,定量(liang)準確快速(su)。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提(ti)供陽性對(dui)照(zhao),便于分析試驗結(jie)果。注意事項:
1.基礎程序;
2.擴增溫度和延伸(shen)溫度;
3.反應時間;
4.循環次數;
5.PCR 反應(ying)液的配制;
6.PCR技術的基(ji)本原(yuan)理;
7.PCR的反應(ying)動力學;
8.PCR擴增產物;
9.PCR反應體系與反應條(tiao)件。
使用(yong)及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定(ding)因素為:
①引物(wu)與模(mo)板DNA特異正確的(de)結合;
②堿基配對(dui)原(yuan)則;
③Taq DNA聚合(he)酶合(he)成反應的忠實性;
④靶(ba)基因的(de)特異性(xing)與(yu)保守性(xing)。
其中引(yin)(yin)物(wu)與模(mo)板的(de)(de)正確(que)結(jie)合(he)(he)是關鍵。引(yin)(yin)物(wu)與模(mo)板的(de)(de)結(jie)合(he)(he)及引(yin)(yin)物(wu)鏈的(de)(de)延(yan)伸是遵循(xun)堿基(ji)配(pei)對原則的(de)(de)。聚(ju)合(he)(he)酶合(he)(he)成反應的(de)(de)忠實(shi)性及Taq DNA聚(ju)合(he)(he)酶耐(nai)高(gao)溫性,使反應中模(mo)板與引(yin)(yin)物(wu)的(de)(de)結(jie)合(he)(he)(復性)可以在較高(gao)的(de)(de)溫度下(xia)進行,結(jie)合(he)(he)的(de)(de)特異性大大增(zeng)加,被擴增(zeng)的(de)(de)靶(ba)基(ji)因片段也就(jiu)能保(bao)持很(hen)高(gao)的(de)(de)正確(que)度。再通過(guo)選擇特異性和保(bao)守性高(gao)的(de)(de)靶(ba)基(ji)因區,其特異性程(cheng)度就(jiu)更高(gao)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wu)的(de)生成(cheng)量(liang)是以指數方式增加(jia)的(de),能(neng)(neng)將皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起始(shi)待測(ce)模板擴增到微克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能(neng)(neng)從100萬個細(xi)胞中檢(jian)(jian)出(chu)(chu)一個靶細(xi)胞;在病毒(du)的(de)檢(jian)(jian)測(ce)中,PCR的(de)靈(ling)敏度可達3個RFU(空斑形成(cheng)單位);在細(xi)菌學中zui小(xiao)檢(jian)(jian)出(chu)(chu)率為(wei)3個細(xi)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(ying)用耐(nai)高(gao)溫的Taq DNA聚合酶(mei),一(yi)次性(xing)地將反應(ying)液(ye)加好后(hou),即在DNA擴(kuo)增液(ye)和(he)水浴鍋上(shang)進行(xing)變(bian)性(xing)-退火-延伸反應(ying),一(yi)般(ban)在2~4 小時完(wan)成擴(kuo)增反應(ying)。擴(kuo)增產物一(yi)般(ban)用電(dian)泳分析,不一(yi)定要用同(tong)位素(su),無(wu)放(fang)射性(xing)污染、易推廣。
(4) 對標(biao)本的純度(du)要求低
不需要分離病毒或(huo)細菌及(ji)培養細胞(bao),DNA 粗(cu)制品及(ji)總RNA均(jun)可作為擴增模板。可直(zhi)接用臨床標本(ben)如血液、體(ti)腔液、洗嗽(sou)液、毛發、細胞(bao)、活(huo)PCR技術概論。