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產品名稱 | 黃桿菌通用PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Flavobacterium spp.PCR |
類別 | PCR檢測試劑盒 |
產品名稱:黃桿菌通用PCR檢測試劑盒
英文名(ming)稱:Flavobacterium spp.PCR
分(fen)類(lei):PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避(bi)光(guang)保存,避(bi)免(mian)反復(fu)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞(di)免(mian)費送貨上(shang)門。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供(gong)樣品(pin) DNA 模板,操作(zuo)簡單,定量準確(que)快速。
2. 引物(wu)經過優(you)化,特(te)異性強。預期的 PCR 產物(wu)長(chang)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含(han)上樣染料,PCR 后可(ke)以直接(jie)上樣電泳(yong)。
4. 提供陽性(xing)對照(zhao),便(bian)于(yu)分析試(shi)驗結果(guo)。注(zhu)意事項:
1.基礎程序;
2.擴(kuo)增溫度(du)和延伸溫度(du);
3.反應時間;
4.循環次數;
5.PCR 反應液的配制(zhi);
6.PCR技術的基(ji)本原理;
7.PCR的(de)反(fan)應(ying)動力學(xue);
8.PCR擴增(zeng)產物;
9.PCR反(fan)應(ying)體系與反(fan)應(ying)條件。
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應(ying)的特異性決(jue)定因素為:
①引物與(yu)模板DNA特異正確的結合;
②堿基(ji)配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與(yu)保(bao)守性。
其中引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)(mo)板(ban)的(de)(de)(de)(de)正確結合(he)是關鍵。引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)(mo)板(ban)的(de)(de)(de)(de)結合(he)及引(yin)物(wu)鏈的(de)(de)(de)(de)延(yan)伸(shen)是遵循堿(jian)基(ji)配對原則的(de)(de)(de)(de)。聚(ju)合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)(de)(de)(de)忠實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合(he)酶耐高(gao)(gao)溫(wen)性(xing),使反(fan)應中模(mo)(mo)板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的(de)(de)(de)(de)結合(he)(復性(xing))可以在較高(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)溫(wen)度下進行(xing),結合(he)的(de)(de)(de)(de)特異(yi)性(xing)大大增(zeng)加,被(bei)擴增(zeng)的(de)(de)(de)(de)靶(ba)基(ji)因片段也就(jiu)能保持很高(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)正確度。再通(tong)過選擇特異(yi)性(xing)和保守性(xing)高(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)靶(ba)基(ji)因區,其特異(yi)性(xing)程度就(jiu)更高(gao)(gao)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(de)生成量(liang)是(shi)以指數(shu)方式增加的(de),能(neng)(neng)將(jiang)皮克(ke)(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始待測模板擴(kuo)增到(dao)微克(ke)(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)(neng)從100萬個(ge)細(xi)(xi)胞(bao)中檢(jian)出一個(ge)靶細(xi)(xi)胞(bao);在(zai)病毒的(de)檢(jian)測中,PCR的(de)靈敏度可達3個(ge)RFU(空斑形成單位(wei));在(zai)細(xi)(xi)菌學(xue)中zui小檢(jian)出率為3個(ge)細(xi)(xi)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反(fan)(fan)應(ying)用耐高溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合(he)酶,一(yi)次(ci)性地將(jiang)反(fan)(fan)應(ying)液加好后,即在DNA擴(kuo)(kuo)增(zeng)液和水浴鍋上進行變(bian)性-退火-延伸(shen)反(fan)(fan)應(ying),一(yi)般在2~4 小時(shi)完成(cheng)擴(kuo)(kuo)增(zeng)反(fan)(fan)應(ying)。擴(kuo)(kuo)增(zeng)產物一(yi)般用電泳分析,不一(yi)定要用同位素,無放(fang)射(she)性污染(ran)、易推廣。
(4) 對(dui)標(biao)本的純度要求低
不需(xu)要分離病毒或細(xi)(xi)菌及(ji)培養細(xi)(xi)胞,DNA 粗(cu)制品及(ji)總RNA均可(ke)作為(wei)擴增模板。可(ke)直(zhi)接用(yong)臨床(chuang)標本如(ru)血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細(xi)(xi)胞、活(huo)PCR技術概論。