產品介紹
細胞名稱:肝癌細胞株
形態特性:上皮樣
生長特性(xing):貼壁生長
特(te)征特(te)性(xing):該(gai)細胞屬專利(li)保藏,其(qi)特征(zheng)特性(xing):尚未公開。
培(pei)養條件: MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法: 1:
3傳代(dai),3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件(jian):基礎(chu)培養(yang)基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱(cheng) | 肝癌細胞株 |
英文簡稱 | LM3 |
狀態 | 貼壁 |
細胞(bao)冷凍(dong)保存(cun):
1.凍存液(ye):92%完全培養基+8%DMSO(可(ke)以根據(ju)實(shi)驗室條件(jian)自行選擇)
2.降溫(wen)步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后(hou)液氮(dan)保存。
細胞培養的操作(zuo)步驟:
1.肝癌細胞株吸走(zou)用于培(pei)養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸(xi)干凈PBS后加入1mL 0.25%胰(yi)酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培(pei)養(yang)(yang)皿使(shi)胰(yi)酶浸沒細(xi)胞(bao)表面,培(pei)養(yang)(yang)瓶放37度培(pei)養(yang)(yang)箱消化(hua);
(細(xi)(xi)胞(bao)對于消(xiao)化(hua)比較敏感,消(xiao)化(hua)過(guo)度(du)會嚴重影響細(xi)(xi)胞(bao)狀態,導致細(xi)(xi)胞(bao)傳代(dai)死亡漂(piao)浮(fu)或者傳代(dai)后不(bu)長。細(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)間隙變大但未脫(tuo)落,可以輕(qing)輕(qing)吹下時(shi)即可終止,禁止消(xiao)化(hua)到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)完全漂(piao)浮(fu)。混勻(yun)細(xi)(xi)胞(bao)時(shi)盡量(liang)輕(qing)柔(rou),不(bu)要吹出大量(liang)氣(qi)泡。)
3.加入6-8ml完全培(pei)養(yang)基(ji)終止消化,輕輕吹(chui)下細胞混勻;
4.將混(hun)勻的細胞(bao)1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yang)基(ji)重懸37度培養(yang)箱(xiang)繼續培養(yang);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。