產品介紹(shao)
細胞名稱:慢性粒細(xi)胞(bao)白血病細(xi)胞(bao)
形(xing)態特性:成(cheng)淋巴細胞
生長(chang)特性:懸浮(fu)生長
特征特性(xing):該細(xi)胞適合做轉(zhuan)染宿(su)主(zhu),來自于一位(wei)53歲女性慢性粒細胞白血病人的胸腔積液
培養條件(jian): IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代(dai)方(fang)法: 1:
3傳(chuan)代(dai),2-3天傳(chuan)一代(dai)
傳代情況: PN5
凍存條件:基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
產品名稱(cheng) | 慢性粒細胞白血病(bing)細胞 |
英文簡(jian)稱(cheng) | K-562 |
狀態 | 貼(tie)壁 |
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據(ju)實驗室條件自行選(xuan)擇)
2.降溫(wen)步(bu)驟:4度10min,-20度2h,-80過夜(ye)后(hou)液氮(dan)保(bao)存(cun)。
細胞培養的操作步驟:
1.慢性粒細胞白血病細胞吸走用于培(pei)養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入(ru)1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面(mian),培養瓶放37度培養箱消(xiao)化;
(細胞對于消(xiao)化(hua)(hua)(hua)比較(jiao)敏(min)感(gan),消(xiao)化(hua)(hua)(hua)過度會嚴重影(ying)響細胞狀態,導致(zhi)細胞傳(chuan)代死亡漂浮或者傳(chuan)代后不(bu)長。細胞消(xiao)化(hua)(hua)(hua)到細胞間隙變大但(dan)未脫落,可(ke)以輕輕吹下時即可(ke)終止,禁止消(xiao)化(hua)(hua)(hua)到細胞完全(quan)漂浮。混勻細胞時盡量(liang)輕柔,不(bu)要吹出大量(liang)氣(qi)泡。)
3.加入6-8ml完全培養基(ji)終止消化,輕(qing)輕(qing)吹下細(xi)胞(bao)混(hun)勻;
4.將混勻的(de)細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄(qi)上清,再用新鮮培(pei)養(yang)基重懸37度培(pei)養(yang)箱繼續培(pei)養(yang);
傳代(dai)比例(li): 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。