產品介(jie)紹
細胞(bao)名稱:高轉(zhuan)移(yi)潛(qian)能肝癌(ai)細胞
形態特性:上皮細胞樣
生長特性:貼壁(bi)生長(chang)
特(te)征特(te)性:該細胞屬專利保藏(zang),其特征特性(xing):尚未公(gong)開。
培養(yang)條件(jian): DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代(dai)方(fang)法: 1:
3傳(chuan)代,3-4天傳(chuan)1次(ci)
傳代情況(kuang): C5
凍存條件(jian):基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 高轉移(yi)潛能肝癌細胞 |
英(ying)文簡稱(cheng) | MHCC97H-GFP-LC3 |
狀(zhuang)態 | 貼壁(bi) |
細(xi)胞(bao)冷凍保存:
1.凍存液:92%完(wan)全培養基+8%DMSO(可以根據實驗(yan)室條件自行(xing)選擇)
2.降溫步驟(zou):4度(du)10min,-20度(du)2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.高(gao)轉移潛(qian)能肝癌細(xi)胞吸(xi)走(zou)用于培養基(ji),加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖(yao)晃培養(yang)皿使胰酶浸沒細胞表面,培養(yang)瓶放37度培養(yang)箱消化(hua);
(細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)對于消化比較敏感(gan),消化過度會(hui)嚴重影響細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)狀(zhuang)態,導致(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)傳代死(si)亡漂(piao)(piao)浮(fu)或(huo)者(zhe)傳代后不(bu)長。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)消化到細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)間隙變大但未脫落,可以(yi)輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)完(wan)全漂(piao)(piao)浮(fu)。混(hun)勻(yun)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)時盡量輕柔,不(bu)要吹出大量氣(qi)泡。)
3.加入6-8ml完全(quan)培養(yang)基終止消化,輕輕吹(chui)下細胞混勻(yun);
4.將(jiang)混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培(pei)(pei)養基重懸(xuan)37度培(pei)(pei)養箱繼續(xu)培(pei)(pei)養;
傳代(dai)比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。