產品介紹(shao)
細胞名(ming)稱(cheng)：人黑色素瘤高轉(zhuan)移細胞亞系
形(xing)態特性：成纖(xian)維細胞樣
生長特性：貼壁生長
特(te)征特(te)性：該(gai)細胞屬(shu)專利保藏，其特征特性：尚未公開。
培養條件： MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法： 1：
3傳代(dai)，3-4天傳1次(ci)
傳(chuan)代情況： C3
凍存條件：基礎培養(yang)基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 人黑(hei)色素瘤高轉(zhuan)移細胞亞系 |
英文(wen)簡稱 | A375sci |
狀(zhuang)態 | 貼壁(bi) |
細胞冷凍(dong)保(bao)存(cun)：
1.凍存液：92%完全培養基+8%DMSO（可以根據實驗室(shi)條件自行選擇）
2.降溫步(bu)驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后(hou)液氮(dan)保(bao)存。
細胞培養的操作步驟：
1.人黑(hei)色素瘤高轉移細胞亞系吸(xi)走用于培養(yang)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；
2.吸干凈PBS后(hou)加入1mL 0.25%胰(yi)酶-0.53mM EDTA，輕(qing)輕(qing)搖晃培(pei)養(yang)皿(min)使(shi)胰(yi)酶浸沒細胞表面，培(pei)養(yang)瓶(ping)放37度培(pei)養(yang)箱消(xiao)化；
（細(xi)(xi)胞(bao)對于消化比較敏(min)感(gan)，消化過度會嚴重影響細(xi)(xi)胞(bao)狀態，導致(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)傳代(dai)死亡漂(piao)浮或者傳代(dai)后不(bu)長(chang)。細(xi)(xi)胞(bao)消化到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)間隙變大(da)但未脫落，可以輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹下時即可終止，禁止消化到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)完全漂(piao)浮。混勻細(xi)(xi)胞(bao)時盡量輕(qing)(qing)柔，不(bu)要(yao)吹出大(da)量氣(qi)泡。）
3.加入6-8ml完(wan)全(quan)培養基終止消化(hua)，輕輕吹(chui)下細胞(bao)混勻；
4.將混勻的細(xi)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮(xian)培養(yang)(yang)基重(zhong)懸37度培養(yang)(yang)箱繼續培養(yang)(yang)；
傳代(dai)比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
