產品介紹
細胞(bao)名(ming)稱(cheng):人黑(hei)色素(su)瘤細胞
形態特(te)性:成纖(xian)維細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:該(gai)細胞是一株人黑色素瘤細胞系。可用于建立動物研究模型。
培養條(tiao)件(jian): MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法(fa): 1:
3傳代(dai),2-3天傳一代(dai)
傳代情況(kuang): C8
凍存條件:基(ji)礎(chu)培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
產品名(ming)稱(cheng) | 人黑色素瘤細胞 |
英文簡(jian)稱 | A875 |
狀(zhuang)態 | 貼壁 |
細(xi)胞(bao)冷(leng)凍保存:
1.凍存(cun)液(ye):92%完全培養基+8%DMSO(可以根(gen)據實驗室條件(jian)自(zi)行選擇)
2.降(jiang)溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜(ye)后(hou)液氮(dan)保存。
細胞培養的操作步(bu)驟:
1.人(ren)黑(hei)色素瘤細(xi)胞吸走用于培(pei)養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰(yi)酶(mei)-0.53mM EDTA,輕輕搖(yao)晃培(pei)養皿使胰(yi)酶(mei)浸沒細胞(bao)表面,培(pei)養瓶放37度培(pei)養箱(xiang)消(xiao)化;
(細(xi)胞對于消化比較敏感,消化過(guo)度會嚴重影響細(xi)胞狀態,導(dao)致(zhi)細(xi)胞傳代死亡(wang)漂浮或者傳代后不(bu)長。細(xi)胞消化到細(xi)胞間(jian)隙變大(da)但(dan)未脫落,可(ke)以輕(qing)(qing)(qing)輕(qing)(qing)(qing)吹(chui)下(xia)時(shi)即可(ke)終(zhong)止,禁(jin)止消化到細(xi)胞完(wan)全漂浮。混勻細(xi)胞時(shi)盡(jin)量(liang)輕(qing)(qing)(qing)柔,不(bu)要吹(chui)出大(da)量(liang)氣泡(pao)。)
3.加(jia)入6-8ml完(wan)全培(pei)養(yang)基終止(zhi)消化,輕(qing)輕(qing)吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用(yong)新鮮培養基重(zhong)懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例(li): 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。