產(chan)品介紹
細(xi)胞(bao)名稱：人黑(hei)色瘤細胞系
形態(tai)特性：成(cheng)纖(xian)維細胞樣
生長(chang)特性(xing)：貼(tie)壁生長
特征特性(xing)：該細(xi)胞源于一(yi)位54歲女性黑色素瘤患者的皮膚組織，由Giard DJ建系。其染色體為超三倍體，帶有62條染色體。其中九條標志染色體普遍存在于A375細胞中，而普通染色體N2, N6和N22在細胞中只有一條。該細胞是與中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞中心交換并保藏。
培養條件： DMEM-H：
Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳(chuan)代(dai)方法： 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代(dai)情(qing)況： C165
凍存條件：基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 人黑色瘤細胞(bao)系(xi) |
英(ying)文簡稱 | A375[A-375] |
狀態 | 貼壁(bi) |
細胞冷凍(dong)保(bao)存：
1.凍存液：92%完全培養基+8%DMSO（可以根據實驗室(shi)條件自行選擇）
2.降(jiang)溫步(bu)驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存(cun)。
細胞培(pei)養的操作步驟：
1.人黑色瘤細胞系吸(xi)走(zou)用于(yu)培養基(ji)，加(jia)入(ru)3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；
2.吸干凈PBS后(hou)加入(ru)1mL 0.25%胰酶(mei)-0.53mM EDTA，輕輕搖晃(huang)培養皿使(shi)胰酶(mei)浸(jin)沒細胞表面，培養瓶(ping)放37度培養箱消化；
（細(xi)胞(bao)對于(yu)消化比較(jiao)敏感，消化過度(du)會(hui)嚴重(zhong)影響細(xi)胞(bao)狀態，導致細(xi)胞(bao)傳(chuan)代死亡漂浮或者傳(chuan)代后不長。細(xi)胞(bao)消化到細(xi)胞(bao)間隙變(bian)大但未脫落，可以輕(qing)輕(qing)吹(chui)(chui)下(xia)時即可終(zhong)止，禁止消化到細(xi)胞(bao)完全漂浮。混勻細(xi)胞(bao)時盡(jin)量輕(qing)柔，不要吹(chui)(chui)出大量氣泡。）
3.加(jia)入6-8ml完(wan)全培養基(ji)終止消化，輕輕吹下細胞混勻；
4.將(jiang)混勻(yun)的細(xi)胞1000rpm（約150g）離(li)心3min，棄(qi)上清，再(zai)用新鮮培(pei)養(yang)(yang)基重懸37度培(pei)養(yang)(yang)箱繼續培(pei)養(yang)(yang)；
傳代(dai)比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
