產品介紹
細胞名稱：人高轉移肝癌細胞
形(xing)態特性：上皮細胞樣；胞質內有顆粒
生長特性：貼(tie)壁(bi)生長
特(te)征(zheng)特(te)性：用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠，進行3次肺轉移篩選，取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發性肺轉移的肝癌細胞系。
培養條件：
傳代方法：
傳(chuan)代情況： PN
凍存條件：基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱(cheng) | 人(ren)高轉移(yi)肝癌(ai)細胞 |
英文簡稱 | HCCLM3 |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷凍保存：
1.凍存液：92%完全培養(yang)基+8%DMSO（可以根據實(shi)驗室(shi)條件自行選(xuan)擇）
2.降溫(wen)步驟：4度(du)10min，-20度(du)2h，-80過(guo)夜后液氮保存。
細(xi)胞培養的操作(zuo)步驟：
1.人(ren)高轉移肝癌(ai)細胞吸走(zou)用(yong)于培養基，加(jia)入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；
2.吸干(gan)凈(jing)PBS后加入1mL 0.25%胰酶(mei)-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培(pei)養(yang)皿(min)使(shi)胰酶(mei)浸沒細胞表面(mian)，培(pei)養(yang)瓶放37度培(pei)養(yang)箱消化；
（細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)對于(yu)消(xiao)化(hua)(hua)比較敏感(gan)，消(xiao)化(hua)(hua)過度會嚴重影(ying)響(xiang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)狀態，導致(zhi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳代死亡(wang)漂浮或者傳代后不(bu)長。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)消(xiao)化(hua)(hua)到(dao)(dao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)間隙(xi)變大但未脫落(luo)，可(ke)以(yi)輕輕吹下時(shi)(shi)即可(ke)終止(zhi)，禁止(zhi)消(xiao)化(hua)(hua)到(dao)(dao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)完全漂浮。混勻細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)時(shi)(shi)盡量(liang)輕柔(rou)，不(bu)要(yao)吹出大量(liang)氣泡。）
3.加(jia)入6-8ml完全培養基終止消化(hua)，輕輕吹(chui)下(xia)細胞混勻；
4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上(shang)清，再用(yong)新鮮(xian)培養(yang)基重(zhong)懸37度培養(yang)箱繼(ji)續(xu)培養(yang)；
傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
