產品介紹
細(xi)胞名稱(cheng):人(ren)高轉移肺癌細胞
形態特(te)性:上皮細胞樣(yang)
生長特(te)性:貼壁(bi)生長
特(te)征特(te)性:這是一株(zhu)高轉移(yi)肺癌。
培(pei)養(yang)條件(jian): RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法:消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況: PN
凍存(cun)條件:完全培養基+8%DMSO
產品名(ming)稱(cheng) | 人高轉移(yi)肺癌細胞 |
英文(wen)簡稱 | 95-D |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷凍保(bao)存:
1.凍(dong)存液:92%完全培養(yang)基+8%DMSO(可(ke)以根據實(shi)驗室條(tiao)件自(zi)行(xing)選擇(ze))
2.降溫(wen)步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液(ye)氮保存(cun)。
細胞培養的操作步驟(zou):
1.人高轉移肺癌細(xi)胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰(yi)酶-0.53mM EDTA,輕(qing)輕(qing)搖晃培養(yang)皿使胰(yi)酶浸沒細胞表面(mian),培養(yang)瓶放37度培養(yang)箱消化(hua);
(細胞(bao)對于消化(hua)比較敏(min)感,消化(hua)過度會嚴重(zhong)影響細胞(bao)狀態,導致細胞(bao)傳(chuan)代死亡漂浮或者傳(chuan)代后不長。細胞(bao)消化(hua)到細胞(bao)間隙變大(da)但未脫落,可以輕(qing)輕(qing)吹下時即可終止,禁(jin)止消化(hua)到細胞(bao)完全漂浮。混勻細胞(bao)時盡量輕(qing)柔,不要吹出(chu)大(da)量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基(ji)終止消化,輕(qing)輕(qing)吹(chui)下細胞混(hun)勻(yun);
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清(qing),再(zai)用新鮮(xian)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)37度培(pei)養(yang)箱繼續培(pei)養(yang);
傳代(dai)比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。