產品介紹(shao)
細胞名(ming)稱(cheng):非何杰(jie)金氏淋巴瘤細胞
形態特性(xing):淋巴母細(xi)胞(bao)樣
生長特性:懸浮生(sheng)長
特(te)征特(te)性:
培養條件:
傳代(dai)方(fang)法(fa):
傳代情況: P11
凍存條件:基(ji)礎(chu)培(pei)養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 非何(he)杰金(jin)氏(shi)淋巴瘤細胞 |
英文簡稱(cheng) | Wein133 |
狀態 | 貼壁(bi) |
細胞冷(leng)凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自(zi)行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞(bao)培養的操作步驟:
1.非何杰金(jin)氏淋巴瘤細胞吸(xi)走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干(gan)凈(jing)PBS后加(jia)入(ru)1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕(qing)輕(qing)搖晃(huang)培養(yang)(yang)皿(min)使胰酶浸(jin)沒(mei)細胞(bao)表面,培養(yang)(yang)瓶(ping)放37度培養(yang)(yang)箱消(xiao)化;
(細(xi)胞(bao)(bao)對于消(xiao)(xiao)(xiao)化比較敏感,消(xiao)(xiao)(xiao)化過(guo)度(du)會嚴重(zhong)影(ying)響細(xi)胞(bao)(bao)狀態,導致(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)傳(chuan)代死亡漂(piao)浮(fu)或者(zhe)傳(chuan)代后不(bu)長。細(xi)胞(bao)(bao)消(xiao)(xiao)(xiao)化到細(xi)胞(bao)(bao)間(jian)隙變大但(dan)未脫(tuo)落,可(ke)以輕(qing)輕(qing)吹下時(shi)即(ji)可(ke)終止(zhi),禁止(zhi)消(xiao)(xiao)(xiao)化到細(xi)胞(bao)(bao)完全漂(piao)浮(fu)。混勻細(xi)胞(bao)(bao)時(shi)盡量輕(qing)柔,不(bu)要(yao)吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化(hua),輕(qing)輕(qing)吹下(xia)細(xi)胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上(shang)清,再(zai)用新鮮培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)37度(du)培(pei)養(yang)箱繼續培(pei)養(yang);
傳(chuan)代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。