產品(pin)介紹
細胞名稱：紅(hong)色熒(ying)光蛋(dan)白標(biao)記人結直腸癌細胞
形態特(te)性：上皮樣；多角形
生長特性：貼壁生長(chang)
特征特性： RFP穩定表達
培養條件： IMDM：
Iscove＇s Modiefied Dulbecco＇s Medium 10%FBS
傳代(dai)方(fang)法： 1：3傳代；3~4天1次。
傳代情(qing)況：
凍(dong)存條(tiao)件：基(ji)礎培(pei)養基(ji)+8%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 紅色熒光蛋(dan)白標記(ji)人(ren)結直腸(chang)癌細胞 |
英文簡稱 | HCT116-RFP |
狀態 | 貼(tie)壁 |
細胞冷(leng)凍保存：
1.凍(dong)存液(ye)：92%完全培養基+8%DMSO（可以(yi)根據實驗室條件(jian)自(zi)行選擇）
2.降(jiang)溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液(ye)氮保存。
細胞培(pei)養的操(cao)作步驟：
1.紅色(se)熒光蛋白標記人(ren)結(jie)直(zhi)腸癌細(xi)胞(bao)吸走用于(yu)培養基，加入(ru)3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；
2.吸(xi)干凈(jing)PBS后加(jia)入1mL 0.25%胰(yi)(yi)酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養皿使胰(yi)(yi)酶浸沒(mei)細胞表面，培養瓶(ping)放37度培養箱消化；
（細(xi)胞(bao)對于(yu)消化(hua)比較(jiao)敏感(gan)，消化(hua)過(guo)度(du)會嚴重(zhong)影響(xiang)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，導致細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)死(si)亡(wang)漂(piao)浮或者傳(chuan)代(dai)后不長(chang)。細(xi)胞(bao)消化(hua)到細(xi)胞(bao)間隙變大(da)但未脫(tuo)落，可以輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹下時即可終止，禁(jin)止消化(hua)到細(xi)胞(bao)完全漂(piao)浮。混勻細(xi)胞(bao)時盡量輕(qing)(qing)柔(rou)，不要吹出大(da)量氣泡。）
3.加入6-8ml完全(quan)培(pei)養基終止消(xiao)化(hua)，輕輕吹下細胞混勻；
4.將混(hun)勻(yun)的(de)細胞1000rpm（約150g）離(li)心3min，棄上清，再用新鮮培養(yang)基(ji)重懸(xuan)37度培養(yang)箱繼續培養(yang)；
傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
