產品介紹
細胞(bao)名稱:青色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞
形態特性:上皮樣;多角(jiao)形
生(sheng)長特性:貼壁生長(chang)
特(te)征特(te)性: CFP穩定表達
培(pei)養(yang)條件(jian): IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法: 1:3傳(chuan)代;3~4天1次。
傳代情況:
凍存(cun)條件(jian):基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
產品名稱(cheng) | 青色熒光蛋白標記人結直腸癌(ai)細胞 |
英文簡稱 | HCT116-CFP |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷(leng)凍保存(cun):
1.凍存(cun)液:92%完全培(pei)養基+8%DMSO(可(ke)以根據實驗室(shi)條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜(ye)后液(ye)氮保存。
細(xi)胞培養的(de)操作步驟:
1.青色熒光蛋白標記人結直腸(chang)癌細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后(hou)加(jia)入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕(qing)輕(qing)搖晃(huang)培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞(bao)對(dui)于消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)比較敏感,消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)過度會嚴重影響(xiang)細胞(bao)狀態,導(dao)致細胞(bao)傳代死(si)亡(wang)漂(piao)浮或者傳代后不長。細胞(bao)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)到(dao)細胞(bao)間(jian)隙變大但未脫落,可(ke)以輕輕吹下(xia)時(shi)即(ji)可(ke)終止,禁(jin)止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)到(dao)細胞(bao)完全漂(piao)浮。混勻細胞(bao)時(shi)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培(pei)養基(ji)終止消(xiao)化,輕(qing)輕(qing)吹下細胞混(hun)勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約(yue)150g)離心3min,棄上清(qing),再用(yong)新鮮培養基(ji)重懸37度培養箱繼(ji)續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。