產(chan)品介紹
細(xi)胞名稱：綠色熒光蛋白(bai)標記(ji)人結直腸癌細胞(bao)
形(xing)(xing)態特性(xing)：上皮樣(yang)；多角形(xing)(xing)
生(sheng)長特性：貼壁(bi)生長
特(te)(te)征特(te)(te)性： GFP穩定表達
培養條(tiao)件： IMDM：
Iscove＇s Modiefied Dulbecco＇s Medium 10%FBS；200ug/ml G418
傳(chuan)代方法： 1：3傳代；3~4天1次。
傳代情(qing)況(kuang)：
凍(dong)存條件：基(ji)(ji)礎培養基(ji)(ji)+8%DMSO+20%FBS
產(chan)品名稱 | 綠色熒光蛋白標(biao)記(ji)人結直(zhi)腸癌細胞 |
英(ying)文簡稱 | HCT116-GFP |
狀態 | 貼壁(bi) |
細胞冷凍保存：
1.凍存液：92%完全培養基+8%DMSO（可以根據(ju)實驗室(shi)條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guo)夜后液氮(dan)保存。
細(xi)胞培養的操作步驟：
1.綠色熒(ying)光蛋白(bai)標記(ji)人結(jie)直腸癌細胞吸(xi)走用于培養基，加(jia)入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；
2.吸(xi)干(gan)凈PBS后加入1mL 0.25%胰(yi)(yi)酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培(pei)養皿使胰(yi)(yi)酶浸沒(mei)細胞(bao)表(biao)面(mian)，培(pei)養瓶(ping)放37度培(pei)養箱(xiang)消化；
（細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)對于消化比較敏感(gan)，消化過度會(hui)嚴(yan)重影(ying)響細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)狀態，導致細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳代死亡漂浮或者傳代后不(bu)長。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)消化到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)間隙變大(da)但未脫落，可(ke)以(yi)輕輕吹(chui)下時即(ji)可(ke)終止(zhi)，禁止(zhi)消化到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)完全漂浮。混勻細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)時盡量輕柔，不(bu)要吹(chui)出大(da)量氣泡(pao)。）
3.加入6-8ml完全培養基終止(zhi)消化，輕輕吹下細胞混勻；
4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄(qi)上清，再用(yong)新鮮(xian)培(pei)養(yang)(yang)基重懸37度培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)繼(ji)續培(pei)養(yang)(yang)；
傳(chuan)代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
