產(chan)品介紹
細胞名(ming)稱：綠色(se)熒光蛋白標記人宮頸癌細(xi)胞
形態特性(xing)：上皮樣；多角
生長(chang)特性：貼壁生(sheng)長
特征特性(xing)：轉染pEGFP-N1，穩定表達綠色熒光蛋白。
培(pei)養條件： RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；G418 200ug/ml
傳(chuan)代方法： 1：3傳(chuan)代(dai)；5~7天1次。
傳(chuan)代情況(kuang)： P5
凍存條件：基(ji)礎(chu)培(pei)養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 綠色(se)熒光蛋白(bai)標記人(ren)宮頸癌細胞 |
英文簡稱 | HeLa-GFP |
狀態(tai) | 貼壁 |
細胞(bao)冷凍保存：
1.凍存(cun)液：92%完全培養基+8%DMSO（可以根據(ju)實驗(yan)室條(tiao)件(jian)自(zi)行(xing)選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guo)夜后液(ye)氮保存(cun)。
細胞培養的操作步(bu)驟：
1.綠色熒光(guang)蛋(dan)白標(biao)記人(ren)宮頸(jing)癌細胞吸(xi)走用(yong)于培(pei)養基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培(pei)養皿使胰酶浸(jin)沒細胞表(biao)面(mian)，培(pei)養瓶放37度培(pei)養箱消化；
（細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)狀態，導致(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)傳代(dai)死(si)亡漂(piao)浮或(huo)者傳代(dai)后不長。細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)消化到(dao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)間隙變大但未脫落，可(ke)(ke)以輕(qing)輕(qing)吹下時即可(ke)(ke)終止，禁止消化到(dao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)完(wan)全漂(piao)浮。混勻細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)時盡量(liang)輕(qing)柔(rou)，不要吹出大量(liang)氣(qi)泡(pao)。）
3.加入6-8ml完(wan)全培養基(ji)終(zhong)止消(xiao)化，輕輕吹下細胞混勻；
4.將(jiang)混勻(yun)的細胞1000rpm（約(yue)150g）離心3min，棄上清，再用新(xin)鮮培養基重懸(xuan)37度培養箱繼續培養；
傳(chuan)代(dai)比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
