產品(pin)介紹(shao)
細胞名(ming)稱(cheng):人鼻(bi)咽癌細胞(bao)
形(xing)態特(te)性:上(shang)皮(pi)樣
生長特性:貼壁生長(chang)
特(te)征特(te)性: 1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系;源自人鼻咽低分化鱗癌組織;原代細胞胰蛋白酶消化,48小時開始生長,首次傳代20天。裸鼠體內移植100%成瘤。
培養條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代(dai)方法: 1:3~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況:不詳
凍存(cun)條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
產品名(ming)稱 | 人鼻咽癌細胞 |
英文簡稱 | CNE-2Z |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷(leng)凍(dong)保(bao)存:
1.凍存液(ye):92%完全(quan)培養基(ji)+8%DMSO(可(ke)以根(gen)據實驗室條件自行(xing)選擇)
2.降溫步驟(zou):4度10min,-20度2h,-80過夜后(hou)液氮保存。
細胞(bao)培(pei)養(yang)的操作(zuo)步驟:
1.人(ren)鼻咽癌(ai)細胞吸走(zou)用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰(yi)(yi)酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yang)皿(min)使胰(yi)(yi)酶浸沒細胞表面,培養(yang)瓶放37度培養(yang)箱消化;
(細胞(bao)(bao)對于消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)比較(jiao)敏感,消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)過度會嚴重影響細胞(bao)(bao)狀態,導致細胞(bao)(bao)傳代(dai)死亡漂浮(fu)或(huo)者傳代(dai)后(hou)不長。細胞(bao)(bao)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)到細胞(bao)(bao)間隙變大但(dan)未脫落,可(ke)以輕(qing)輕(qing)吹(chui)(chui)下時(shi)即可(ke)終(zhong)止,禁止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)到細胞(bao)(bao)完全漂浮(fu)。混(hun)勻細胞(bao)(bao)時(shi)盡量輕(qing)柔(rou),不要吹(chui)(chui)出大量氣(qi)泡(pao)。)
3.加入(ru)6-8ml完全(quan)培養基終止(zhi)消(xiao)化,輕(qing)輕(qing)吹下(xia)細胞(bao)混勻;
4.將混(hun)勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清(qing),再(zai)用新鮮培(pei)(pei)養基重懸37度培(pei)(pei)養箱(xiang)繼續培(pei)(pei)養;
傳代比(bi)例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。