產品(pin)介紹(shao)
細(xi)胞名稱:永生化(hua)人肝癌血(xue)管(guan)內皮細胞系
形態特性:上皮樣
生長特性:貼(tie)壁(bi)生長
特征特性:該細胞屬專(zhuan)利保(bao)藏,其特征特性:尚(shang)未公開。
培養條件(jian): 10%FBS
傳(chuan)代方(fang)法:無
傳代情況(kuang): 1:3傳代,3-4天傳1次(ci)
凍存條件: C5
產(chan)品名稱 | 永生化人肝癌(ai)血管內皮細胞系 |
英文簡稱(cheng) | ECDHCC-1 |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷凍(dong)保存:
1.凍存液(ye):92%完(wan)全培養(yang)基+8%DMSO(可以根據實驗室條(tiao)件自行(xing)選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保(bao)存。
細胞培(pei)養的操作步驟:
1.永(yong)生化人(ren)肝癌血管內皮(pi)細胞系吸(xi)走(zou)用于培養(yang)基,加入(ru)3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加(jia)入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱(xiang)消(xiao)化;
(細(xi)(xi)胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴(yan)重影(ying)響細(xi)(xi)胞狀態,導致(zhi)細(xi)(xi)胞傳(chuan)代死亡漂浮或者傳(chuan)代后不(bu)長。細(xi)(xi)胞消化到(dao)細(xi)(xi)胞間隙變(bian)大(da)但未脫(tuo)落,可(ke)以(yi)輕輕吹下時即可(ke)終止,禁止消化到(dao)細(xi)(xi)胞完全漂浮。混勻細(xi)(xi)胞時盡量輕柔,不(bu)要吹出大(da)量氣泡。)
3.加入(ru)6-8ml完全培養基(ji)終止(zhi)消化,輕輕吹(chui)下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用(yong)新鮮培(pei)養基重懸37度培(pei)養箱繼(ji)續培(pei)養;
傳代(dai)比(bi)例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。