產品介紹
細胞名稱:腺(xian)病毒(du)轉(zhuan)化的人胚腎細胞
形態特性(xing):上皮細胞
生長特性:貼壁生長(chang)
特征(zheng)特性:我們推薦使用(yong)AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株,但產生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣,AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因,當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質粒)時,可以產生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
培養條件: DMEM-H:
Dulbecco's Modified
傳代方法:消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nei)可長(chang)滿。
傳代情況: P(10+5)
凍存條件:完全培養基+8%DMSO
產品名稱 | 腺病毒轉化的人胚(pei)腎細胞 |
英文簡稱 | AAV-293 |
狀態 | 貼壁 |
細(xi)胞(bao)冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yang)基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇(ze))
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過(guo)夜后液氮保(bao)存。
細(xi)胞培養的操作步驟:
1.腺病毒(du)轉化的人胚腎細胞吸(xi)走用于培養基,加(jia)入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yang)(yang)皿使胰酶浸沒(mei)細胞表面,培養(yang)(yang)瓶放37度培養(yang)(yang)箱消化(hua);
(細(xi)胞對(dui)于消化(hua)比較敏(min)感,消化(hua)過(guo)度會嚴(yan)重影響細(xi)胞狀態,導致細(xi)胞傳代(dai)(dai)死亡漂(piao)浮(fu)或者傳代(dai)(dai)后不(bu)(bu)長。細(xi)胞消化(hua)到細(xi)胞間(jian)隙變大但未脫落,可以輕輕吹下(xia)時即可終止(zhi),禁止(zhi)消化(hua)到細(xi)胞完全漂(piao)浮(fu)。混勻細(xi)胞時盡量輕柔,不(bu)(bu)要(yao)吹出大量氣(qi)泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕(qing)輕(qing)吹(chui)下(xia)細(xi)胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離(li)心3min,棄(qi)上清(qing),再用(yong)新鮮培養(yang)(yang)基重(zhong)懸37度培養(yang)(yang)箱繼續(xu)培養(yang)(yang);
傳代比(bi)例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。