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腺(xian)病毒(du)轉化(hua)的人胚腎(shen)細胞(bao) 
腺病毒轉化的人胚腎細胞
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簡稱 : AAV-293
種屬 :
貨號 : E1875
價格 :
0.00
培養基 : DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(you)質胎牛血清,10% ?
狀態 : 貼(tie)壁
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產品介紹

細胞名稱:腺(xian)病毒(du)轉(zhuan)化的人胚腎細胞

形態特性(xing):上皮細胞

生長特性:貼壁生長(chang)

特征(zheng)特性:我們推薦使用(yong)AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株,但產生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣,AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因,當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質粒)時,可以產生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。

培養條件: DMEM-H:

Dulbecco's Modified
傳代方法:消化3-5分鐘。1:

2。3天內(nei)可長(chang)滿。  

傳代情況: P(10+5)

凍存條件:完全培養基+8%DMSO

產品名稱

腺病毒轉化的人胚(pei)腎細胞

英文簡稱

AAV-293

狀態

貼壁

細(xi)胞(bao)冷凍保存:

1.凍存液:92%完全培養(yang)基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇(ze))

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過(guo)夜后液氮保(bao)存。

細(xi)胞培養的操作步驟:

1.腺病毒(du)轉化的人胚腎細胞吸(xi)走用于培養基,加(jia)入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yang)(yang)皿使胰酶浸沒(mei)細胞表面,培養(yang)(yang)瓶放37度培養(yang)(yang)箱消化(hua);

(細(xi)胞對(dui)于消化(hua)比較敏(min)感,消化(hua)過(guo)度會嚴(yan)重影響細(xi)胞狀態,導致細(xi)胞傳代(dai)(dai)死亡漂(piao)浮(fu)或者傳代(dai)(dai)后不(bu)(bu)長。細(xi)胞消化(hua)到細(xi)胞間(jian)隙變大但未脫落,可以輕輕吹下(xia)時即可終止(zhi),禁止(zhi)消化(hua)到細(xi)胞完全漂(piao)浮(fu)。混勻細(xi)胞時盡量輕柔,不(bu)(bu)要(yao)吹出大量氣(qi)泡。)

3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕(qing)輕(qing)吹(chui)下(xia)細(xi)胞混勻;

4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離(li)心3min,棄(qi)上清(qing),再用(yong)新鮮培養(yang)(yang)基重(zhong)懸37度培養(yang)(yang)箱繼續(xu)培養(yang)(yang);

傳代比(bi)例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。


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