產品(pin)介(jie)紹
細胞名(ming)稱:表(biao)達小(xiao)鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞
形態特性(xing):上皮樣;多角
生長特(te)性:貼壁生長
特征特性:該細胞(bao)來源于293細胞,能表達小鼠MHCⅠ類分子Kb。
培養條(tiao)件: IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方(fang)法: 1:
6傳代;2天(tian)1次
傳代情況:不詳
凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
產品名(ming)稱 | 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的(de)人胚腎細胞 |
英文簡稱 | 293KB |
狀(zhuang)態 | 貼壁 |
細胞冷凍保(bao)存:
1.凍存液:92%完全培養(yang)基+8%DMSO(可以根據實驗室條件(jian)自行選擇)
2.降溫步驟(zou):4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮(dan)保存(cun)。
細(xi)胞(bao)培養的操作步驟:
1.表達小鼠(shu)MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞吸走用于培(pei)養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰(yi)(yi)酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培(pei)養(yang)皿使(shi)胰(yi)(yi)酶浸沒細(xi)胞表(biao)面,培(pei)養(yang)瓶放37度培(pei)養(yang)箱消化;
(細(xi)(xi)(xi)胞(bao)對于消(xiao)化比較敏感,消(xiao)化過度(du)會(hui)嚴重(zhong)影響細(xi)(xi)(xi)胞(bao)狀態,導致細(xi)(xi)(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)死亡(wang)漂浮或(huo)者傳(chuan)代(dai)后(hou)不長。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)間隙變大但未脫(tuo)落,可(ke)以輕(qing)輕(qing)吹下時即(ji)可(ke)終止,禁止消(xiao)化到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)完(wan)全漂浮。混(hun)勻細(xi)(xi)(xi)胞(bao)時盡量輕(qing)柔,不要吹出(chu)大量氣(qi)泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yang)基(ji)終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離(li)心3min,棄(qi)上清(qing),再用新鮮培(pei)養(yang)基重懸37度(du)培(pei)養(yang)箱繼續(xu)培(pei)養(yang);
傳(chuan)代(dai)比(bi)例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。