產(chan)品介紹
細胞名稱:表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞
形態特性:上皮樣;多角
生長特性(xing):貼壁生(sheng)長
特征特性:該細胞來(lai)源(yuan)于(yu)293細胞,可以表達SV40T和EBNA1。
培(pei)養條件: IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法: 1:
6傳代;2天1次(ci)
傳代(dai)情況(kuang):不詳
凍(dong)存(cun)條件:基礎(chu)培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
產品名(ming)稱(cheng) | 表(biao)達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞 |
英文簡稱(cheng) | 293ET |
狀態 | 貼(tie)壁 |
細胞(bao)冷凍保存(cun):
1.凍存液(ye):92%完全(quan)培養基(ji)+8%DMSO(可以根據(ju)實驗室條件(jian)自行選擇)
2.降溫步驟:4度(du)10min,-20度(du)2h,-80過夜后(hou)液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.表(biao)達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后(hou)加入1mL 0.25%胰(yi)酶(mei)-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培(pei)養皿使胰(yi)酶(mei)浸(jin)沒細胞表面(mian),培(pei)養瓶放(fang)37度培(pei)養箱(xiang)消化;
(細胞(bao)(bao)(bao)對于消(xiao)化(hua)比較敏(min)感(gan),消(xiao)化(hua)過度會嚴重影響細胞(bao)(bao)(bao)狀態,導(dao)致細胞(bao)(bao)(bao)傳代死(si)亡漂(piao)浮或者傳代后不(bu)長。細胞(bao)(bao)(bao)消(xiao)化(hua)到細胞(bao)(bao)(bao)間隙變大但(dan)未(wei)脫落,可以(yi)輕輕吹下時即可終止,禁止消(xiao)化(hua)到細胞(bao)(bao)(bao)完全漂(piao)浮。混勻細胞(bao)(bao)(bao)時盡(jin)量輕柔,不(bu)要吹出(chu)大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化(hua),輕(qing)輕(qing)吹下(xia)細(xi)胞(bao)混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄(qi)上清,再用(yong)新鮮培養基重懸37度培養箱繼續(xu)培養;
傳代(dai)比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。