產(chan)品介紹
細胞名稱:穩(wen)定表達(da)EBNA1的人胚腎細胞
形態特性:上皮(pi)樣(yang);多角
生(sheng)長(chang)特性:貼壁生長
特征特性:該細胞來源于293細胞,穩定表達EBNA1。
培(pei)養條件: IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法(fa): 1:
6傳代;2天(tian)1次
傳代情況:不詳
凍存條(tiao)件(jian):基礎(chu)培養基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 穩定表達EBNA1的(de)人(ren)胚(pei)腎細(xi)胞 |
英文簡稱 | 293E |
狀態 | 貼壁 |
細胞(bao)冷(leng)凍保存(cun):
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步(bu)驟:4度(du)10min,-20度(du)2h,-80過(guo)夜后液氮保存。
細胞培養的操(cao)作步驟:
1.穩(wen)定表(biao)達EBNA1的人胚腎細胞吸走用于(yu)培(pei)養(yang)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈(jing)PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕(qing)輕(qing)搖晃培(pei)養皿使胰酶浸沒細胞表面(mian),培(pei)養瓶(ping)放37度培(pei)養箱消化;
(細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)對于消化比較(jiao)敏感,消化過度會嚴重影響細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)狀態,導致(zhi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳(chuan)代死亡漂浮或者傳(chuan)代后(hou)不長。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)消化到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)間隙變大但未脫落,可(ke)以輕輕吹(chui)下(xia)時即(ji)可(ke)終(zhong)止,禁(jin)止消化到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)完全漂浮。混(hun)勻細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)時盡量輕柔(rou),不要吹(chui)出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消(xiao)化,輕輕吹下細(xi)胞混勻;
4.將混勻(yun)的細胞1000rpm(約(yue)150g)離(li)心3min,棄上清,再用新鮮培養(yang)基(ji)重懸(xuan)37度培養(yang)箱繼續培養(yang);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。