產品(pin)介紹
細胞(bao)名稱:血(xue)管平(ping)滑(hua)肌細胞(bao)
形態特性(xing):成(cheng)纖(xian)維細胞樣
生(sheng)長特性:貼(tie)壁(bi)生長
特征(zheng)特性: T/G HA-VSMC細胞建系于1992年(Tilberg A F,et al)。該細胞系屬有限細胞系,可因連續傳代而衰老死亡。連續傳代試驗顯示,T/G HA-VSMC細胞經歷15-20個群體倍增時間就會衰老死亡,固需控制有限的傳代次數。
培養條件: F12K 10%FBS;加多種生長因子,詳見參考文獻
傳代方(fang)法: 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳(chuan)代(dai)情況: C15
凍存(cun)條件:基(ji)礎培(pei)養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
產品名稱(cheng) | 血(xue)管平(ping)滑肌細胞 |
英文(wen)簡稱 | T/GHA-VSMC |
狀態 | 貼壁(bi) |
細胞(bao)冷凍保存:
1.凍存(cun)液:92%完(wan)全培養基(ji)+8%DMSO(可以根據(ju)實驗室條件自行選擇)
2.降(jiang)溫(wen)步(bu)驟:4度(du)10min,-20度(du)2h,-80過夜(ye)后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.血(xue)管平滑肌細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后(hou)加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿(min)使胰酶浸沒(mei)細胞(bao)表面,培養瓶放37度培養箱消(xiao)化;
(細(xi)(xi)胞(bao)(bao)對于消化(hua)(hua)比較敏(min)感,消化(hua)(hua)過度(du)會嚴重影響細(xi)(xi)胞(bao)(bao)狀態(tai),導(dao)致細(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳代死(si)亡漂浮(fu)或者傳代后不(bu)長。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)消化(hua)(hua)到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)間隙變大但未脫落,可以(yi)輕輕吹下時(shi)即可終(zhong)止(zhi),禁止(zhi)消化(hua)(hua)到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)完全漂浮(fu)。混勻細(xi)(xi)胞(bao)(bao)時(shi)盡量輕柔,不(bu)要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培(pei)養基終止(zhi)消化,輕(qing)輕(qing)吹(chui)下細(xi)胞混勻(yun);
4.將混勻的細胞(bao)1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續(xu)培養;
傳(chuan)代比(bi)例(li): 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。